蛋白全谱分析,也可称Shotgun分析,研究对象多为完整的组织、细胞、体液等蛋白组成较为复杂的样本或其蛋白提取物,其目的在于尽可能多的鉴定出样本中蛋白质的种类。
技术原理:蛋白全谱分析是基于“Bottum-Up”即自下而上的蛋白质质组学检测策略,先将提取出的蛋白质利用特异性的蛋白酶消化获得肽段混合物,依次通过色谱分离,离子化以得到不同质荷比的带电离子,通过质量分析器将不同质荷比的肽段离子分离开来进一步采集离子的质谱图,将实际质谱图与理论质谱图进行比对,从而对蛋白质进行鉴定。
适用范围
1。 某一生理状态下组织、细胞或者细胞器中所有表达蛋白质的鉴定;
2。 未知物种的蛋白表达谱鉴定;
3. 某一方法提纯的混合蛋白鉴定。
技术优势
高通量,分离能力强;
兼容性强,可分析蛋白质条带、组织提取液、全细胞裂解液、亚细胞分离组分等;
自动化程度高。
技术流程
生信分析
送样要求
样品类型 |
样品要求(/组样品) |
备注 |
蛋白质溶液 |
蛋白质总量≥300µg |
重复实验则量翻倍,建议准备两份样品备用。 |
组织样品 |
样品总量≥0.1g |
按照蛋白质组织提取效率(蛋白:组织=7%) |
细胞样品 |
细胞数量≥107个 |
胰酶消化,按细胞冻存标准离心收集细胞即可。 |
体液样品 |
血清≥200µL,脑脊液≥200µL,尿液≥1mL ,泪液≥1mL. |
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Proteomic analysis and food-grade enzymes of Moringa oleifer Lam. a Lam. flower
辣木的蛋白质组学分析
Int J Biol Macromol, IF = 3.909
参考文献:
Shi Y, Wang X, Huang A。 Proteomic analysis and food-grade enzymes of Moringa oleifer Lam。 a Lam。 flower。。 [J]。 Int J Biol Macromol。 2018。115:883-890。 doi: 10。1016/j。ijbiomac。2018。04。109
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